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標準植物提取物與比例提取物的檢測方法對比

作者: 植物提取物廠家 添加時間:2017-11-14 來源:植物提取物廠家

      植物提取物的檢測方法常見的有五種:高效液相色譜分析法(HPLC)、紫外吸收光譜分析法(UV)、薄層色譜分析法(TLC)、氣相色譜分析法(GC)和原子吸收光譜分析法(AAS)。
      每一種方法的作用原理和應用都各不相同。其中,HPLC和UV為標準植物提取物的常用檢測方法,TLC被用於比例植物提取物的檢測,GC用來檢測揮發性液體或油類,AAS用於提取物重金屬含量的檢測。
      在此,實驗室以板藍根提取物水楊酸含量HPLC檢測和薄荷10:1TLC檢測為例,來對比例植物提取物與標準植物提取物的檢測方法進行對比分析。
      HPLC檢測法與TLC檢測方法介紹
      HPLC高效液相色譜分析法,又稱“高壓液相色譜”、“近代柱色譜”等。它是色譜法的一個重要分支,以液體為流動相,采用高壓輸液係統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩衝液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
      TLC薄層色譜分析法,又稱薄層層析。是快速分離和定性分析少量物質的一種很重要的實驗技術,屬固—液吸附色譜。在被洗滌幹淨的玻板(10×3cm左右)上均勻的塗一層吸附劑或支持劑,待幹燥、活化後將樣品溶液用管口平整的毛細管滴加於離薄層板一端約1cm處的起點線上,涼幹或吹幹後置薄層板於盛有展開劑的展開槽內,浸入深度為0.5cm。待展開劑前沿離頂端約1cm附近時,將色譜板取出,幹燥後噴以顯色劑,或在紫外燈下顯色。
      板藍根水楊酸HPLC檢測和薄荷10:1TLC檢測試驗
      板藍根提取物-水楊酸含量HPLC測定法
      1.方法原理:樣品加甲醇稀釋,經液相色譜分析儀,在225nm處測定峰麵積,外標法測定水楊酸含量。
      2.儀器設備及實驗條件:(1)儀器設備:高效液相色譜儀(在線真空脫氣機、四元梯度泵、DAD 檢測器、化學工作站)(2)色譜條件:色譜柱:Kromasil C<sub>18</sub>柱(4.6mm×250mm,5μm);流動相:乙腈-1%醋酸水溶液(25∶75);檢測波長:225nm;流速:1.0mL·min<sup>-1</sup>;柱溫為:室溫。
      試樣製備、(1)對照品溶液的配製:精密稱定幹燥的水楊酸對照品10.6mg,100mL量瓶甲醇定容,搖勻,即得;(2)供試品溶液的製備:精密稱取板藍根提取物0.25g,置100mL量瓶中,加甲醇溶液並稀釋至刻度,搖勻,精密量取上述溶液1mL,置100mL量瓶中,甲醇稀釋至刻度,搖勻,即得。
      3.分別精密吸取對照品與供試品溶液各10μL,注入液相色譜儀,按外標法以峰麵積計算含量。
      薄荷10:1TLC檢測:
      1.取本品粉末5g,以85%乙醇溶解並加至刻度,精密吸取10ml置20ml容量瓶中,用60%乙醇稀釋至刻度,搖勻,備用。  
      2.另取薄荷對照藥材5g,同法製成對照藥材溶液。
      3.照薄層色譜法(TLC)試驗,吸取上述兩種溶液各4μl,分別點於同一矽膠G薄層板上,以乙酸乙酯一甲醇一濃氨試液(9:1:0.5)為展開劑,展開,取出,晾幹,噴以10%磷鉬酸乙醇溶液,在105℃加熱至斑點顯色清晰。供試品色譜中,在與對照藥材色譜相應的位置上,顯相同顏色的斑點。
      簡單來說,比例提取物與標準提取物檢測的根本不同在於,標準提取物是按照某一標準進行提取而得,因此它的分析為定量分析,即試驗中通過HPLC法測定板藍根提取物產品中水楊酸成分的含量。而比例植物提取物產品的成分、含量不可測,是為定性分析,即實驗中通過TLC法確定產品薄荷10:1確是薄荷。
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